Vigilancia ambiental de la circulación de poliovirus en tres municipios considerados como punto transitorio de migrantes en Colombia 2017-2019 / Environmental surveillance of the circulation of poliovirus in municipalities considered as transitory point of migrants in Colombia 2017-2019

Resumen Objetivo: Determinar la circulación de poliovirus en tres municipios considerados como punto transitorio de migrantes en Colombia. Material y método: Se colectaron muestras de aguas residuales (n=36) de municipios fronterizos, seleccionados por mayor tránsito de migrantes regulares como irregulares, en el periodo comprendido entre el 2017-2019. Las muestras fueron concentradas y cultivadas siguiendo el algoritmo de vigilancia ambiental para la circulación de poliovirus de la Organización Mundial de la Salud (OMS). La identificación molecular se realizo mediante reacción en cadena de la polimerasa empleando cebadores específicos de grupo, de serotipo y de cepa vacunal sabin. Resultados y Discusión: Se detectó la presencia de Enterovirus no polio (EVNP) en las muestras ambientales obtenidas y no se hallo circulación de poliovirus deriva dos de la vacuna ni de poliovirus salvaje en los tres municipos evaluados; sin embargo en dos estudios previos publicados por Gonzalez y col con una metodologia similar en el año 2005 y 2015 evaluando las aguas residuales de la ciudad de Armenia-Quindio; se logró identificar la presencia de virus derivado de vacuna, con resultados negativos para la identificación de poliovirus salvaje. Conclusiones: Los hallazgos indican que el sistema de monitoreo de aguas residuales con el fin de determinar la presencia de virus es una herramienta util para realizar vigilancia ambiental.

Abstract Objective: To determine the circulation of poliovirus in three municipalities considered as transitory points for migrants in Colombia. Material and Method: Wastewater samples (n = 36) were collected from border municipalities, selected for greater transit of regular and irregular migrants, in the period between 2017-2019. The samples were concentrated and cultured following the World Health Organization (WHO) environmental surveillance algorithm for poliovirus circulation. Molecular identification was performed by polymerase chain reaction using group-specific, serotype and sabin vaccine strain primers. Results: The presence of non-polio Enterovirus (NPV) was detected in the environmental samples obtained and no circulation of poliovirus derived from the vaccine or wild poliovirus was found in the three evaluated municipalities; However, in two previous studies published by Gonzales et al with a similar methodology in 2005 and 2015 evaluating the wastewater of the city of Armenia-Quindío; It was possible to identify the presence of virus derived from vaccine, with negative results for the identification of wild poliovirus. Conclusions: The findings indicate that the wastewater monitoring system in order to determine the presence of viruses is a useful tool to carry out environmental surveillance.

Interleuquina-6 y factor de necrosis tumoral-α en el suero y líquido cefalorraquídeo de niños con meningoencefalitis viral / Interleukin-6 and tumor necrosis factor-α in serum and cerebrospinal fluid from children with viral meningoencephalitis

Introducción: las meningoencefalitis virales en el niño son causadas con mayor frecuencia por enterovirus, y tienen un curso generalmente benigno y autolimitado. Objetivo: estimar las concentraciones de interleuquina-6 y factor de necrosis tumoral-α en suero y líquido cefalorraquídeo de niños con meningoencefalitis viral. Métodos: se realizó un estudio descriptivo y transversal. Se estudiaron 61 pacientes, con edades entre 1 mes y 17 años con diagnóstico de meningoencefalitis viral por cuadro clínico, estudio citoquímico de líquido cefalorraquídeo y detección de genoma viral de enterovirus por reverso trascripción y reacción en cadena de la polimerasa. Se determinaron concentraciones de interleuquina-6 y factor de necrosis tumoral-α en 48 muestras de suero y 35 de líquido cefalorraquídeo. Para el análisis estadístico se empleó, la prueba de Wilcoxon para 2 muestras relacionadas, y la de Spearman para correlacionar las concentraciones de citoquinas. Resultados: se detectó genoma viral en 3 muestras de líquido cefalorraquídeo con celularidad aumentada y predominio de polimorfonucleares, y en 3 muestras con celularidad normal. La cuantificación de interleuquina-6 en suero, fue 91,6 ± 39,0 pg/mL; y de factor de necrosis tumoral-α 106,5 ± 54,6 pg/mL. En el líquido cefalorraquídeo la cuantificación de interleuquina-6 fue de 109,65 ± 49,6 pg/mL, y de factor de necrosis tumoral-α 75,28 ± 29,9 pg/mL. Conclusiones: se determinaron concentraciones elevadas de interleuquina-6 y de factor de necrosis tumoral-α en todas las muestras estudiadas. Este último se detectó más elevado en el suero, mientras la interleuquina-6 se elevó más en el líquido cefalorraquídeo, y se correlacionó positivamente con sus valores en suero y con los del factor de necrosis tumoral-α(AU)

Introduction: viral meningoencephalitis affecting the child is caused mainly by enteroviruses and have generally self-limited benign course. Objective: to estimate the interleukin-6 and tumor necrosis factor-α present in the serum and the cerebrospinal fluid of children suffering viral meningoencephalitis. Method: cross-sectional descriptive study of 61 patients aged one month to 17 years and diagnosed with viral meningoencephalitis. The diagnosis was based on their clinical picture, the cytochemical study of their cerebrospinal fluid and the detection of enterovirus viral genome through the reverse transcriptase polymerase chain reaction. Forty eight serum samples and 35 cerebrospinal fluid samples served to determine the interleukin-6 and tumor necrosis factor-α concentrations. The statistical analysis included Wilcoxon's test for 2 related samples and the Spearman's test for correlating cytokine concentrations. Results: viral genome was detected in 3 cerebrospinal fluid samples with increased cellularity and predominant polymorphonuclear neutrophils and in other 3 samples with normal cellularity. The quantitation of serum interleukin-6 and of tumor necrosis factor-alpha were 91.6 ± 39.0 pg/mL and 106.5 ± 54.6 pg/mL, respectively. The interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels in the cerebrospinal fluid amounted to 109.65 ± 49.6 pg/mL, and 75.28 ± 29.9 pg/mL, respectively. Conclusions: high interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels were found in all the studied samples. The factor concentrations were higher in the serum whereas those of interleukin-6 were higher in the cerebrospinal fluid; there was positive correlation between interleukin-6 values in the serum and those of the tumor necrosis factor-alpha(AU)

Interleuquina-6 y factor de necrosis tumoral-a en el suero y líquido cefalorraquídeo de niños con meningoencefalitis viral / Interleukin-6 and tumor necrosis factor-a in serum and cerebrospinal fluid from children with viral meningoencephalitis

INTRODUCCIÓN: las meningoencefalitis virales en el niño son causadas con mayor frecuencia por enterovirus, y tienen un curso generalmente benigno y autolimitado. OBJETIVO: estimar las concentraciones de interleuquina-6 y factor de necrosis tumoral-a en suero y líquido cefalorraquídeo de niños con meningoencefalitis viral. MÉTODOS: se realizó un estudio descriptivo y transversal. Se estudiaron 61 pacientes, con edades entre 1 mes y 17 años con diagnóstico de meningoencefalitis viral por cuadro clínico, estudio citoquímico de líquido cefalorraquídeo y detección de genoma viral de enterovirus por reverso trascripción y reacción en cadena de la polimerasa. Se determinaron concentraciones de interleuquina-6 y factor de necrosis tumoral-a en 48 muestras de suero y 35 de líquido cefalorraquídeo. Para el análisis estadístico se empleó, la prueba de Wilcoxon para 2 muestras relacionadas, y la de Spearman para correlacionar las concentraciones de citoquinas. RESULTADOS: se detectó genoma viral en 3 muestras de líquido cefalorraquídeo con celularidad aumentada y predominio de polimorfonucleares, y en 3 muestras con celularidad normal. La cuantificación de interleuquina-6 en suero, fue 91,6 ± 39,0 pg/mL; y de factor de necrosis tumoral-α 106,5 ± 54,6 pg/mL. En el líquido cefalorraquídeo la cuantificación de interleuquina-6 fue de 109,65 ± 49,6 pg/mL, y de factor de necrosis tumoral-a 75,28 ± 29,9 pg/mL. CONCLUSIONES: se determinaron concentraciones elevadas de interleuquina-6 y de factor de necrosis tumoral-a en todas las muestras estudiadas. Este último se detectó más elevado en el suero, mientras la interleuquina-6 se elevó más en el líquido cefalorraquídeo, y se correlacionó positivamente con sus valores en suero y con los del factor de necrosis tumoral-a.

INTRODUCTION: viral meningoencephalitis affecting the child is caused mainly by enteroviruses and have generally self-limited benign course. OBJECTIVE: to estimate the interleukin-6 and tumor necrosis factor-a present in the serum and the cerebrospinal fluid of children suffering viral meningoencephalitis. METHOD: cross-sectional descriptive study of 61 patients aged one month to 17 years and diagnosed with viral meningoencephalitis. The diagnosis was based on their clinical picture, the cytochemical study of their cerebrospinal fluid and the detection of enterovirus viral genome through the reverse transcriptase polymerase chain reaction. Forty eight serum samples and 35 cerebrospinal fluid samples served to determine the interleukin-6 and tumor necrosis factor-a concentrations. The statistical analysis included Wilcoxon's test for 2 related samples and the Spearman's test for correlating cytokine concentrations. RESULTS: viral genome was detected in 3 cerebrospinal fluid samples with increased cellularity and predominant polymorphonuclear neutrophils and in other 3 samples with normal cellularity. The quantitation of serum interleukin-6 and of tumor necrosis factor-alpha were 91.6 ± 39.0 pg/mL and 106.5 ± 54.6 pg/mL, respectively. The interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels in the cerebrospinal fluid amounted to 109.65 ± 49.6 pg/mL, and 75.28 ± 29.9 pg/mL, respectively. CONCLUSIONS: high interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels were found in all the studied samples. The factor concentrations were higher in the serum whereas those of interleukin-6 were higher in the cerebrospinal fluid; there was positive correlation between interleukin-6 values in the serum and those of the tumor necrosis factor-alpha.

Frecuencia de enterovirus en niños con meningoencefalitis viral / Enterovirus frequency in children with viral meningoencephalitis

Introducción: el enterovirus es uno de los agentes causales que suelen afectar el sistema nervioso central. Objetivos: determinar la frecuencia de enterovirus en niños hospitalizados con meningoencefalitis. Métodos: se efectuó un estudio descriptivo-observacional de 66 infantes con meningoencefalitis viral, ingresados en el Hospital Pediátrico Provincial Dr Eduardo Agramonte Piña de la provincia de Camagüey, desde enero de 2011 hasta julio de 2012. Resultados: 26,6 por ciento de los afectados fueron aislados por enterovirus en el año 2011 y 84,3 por ciento en el 2012. El agente diagnosticado fue ECHO virus 30, el cual afectó todas las edades con positividad entre 63,0 y 100,0 por ciento. Prevaleció el sexo masculino (78,4 por ciento) procedentes de 11 municipios, con positividades superiores a 70 por ciento en Florida y Camagüey. Los síntomas predominantes fueron cefaleas, fiebre, vómitos y malestar general. A la mayoría de los pacientes se le realizó estudio citoquímico del líquido cefaloraquídeo entre 10 y 199 células por 106/L con predominio linfocitario.Conclusiones: gran parte de los afectados evolucionaron satisfactoriamente con hospitalización de solo 4 días(AU)

Introduction: the enterovirus is one of the causal agents usually affecting the central nervous system. Objectives: to determine the enterovirus frequency in children hospitalized with meningoencephalitis. Methods: a descriptive-observational study of 66 infants with viral meningoencephalitis admitted in Dr Eduardo Agramonte Piña Provincial Pediatric Hospital was carried out in Camagüey province from January, 2011 to July, 2012. Results: 26.6 percent of the affected ones were isolated due to enterovirus in the year 2011 and 84.3 percent in 2012. The diagnosed agent was ECHO virus 30, which affected all the ages with positivity between 63.0 and 100.0 percent. The male sex prevailed (78. percent) coming from 11 municipalities, with positivities higher than 70 percent in Florida and Camagüey. The predominant symptoms were migraines, fever, vomits and general uneasiness. Most of the patients had a cytochemical study of the cerebrospinal fluid from 10 and 199 cells per 106/L with lymphocytes prevalence.Conclusions: great number of the affected patients had a satisfactory clinical course with hospital stay of just 4 days(AU)

Frecuencia de enterovirus en niños con meningoencefalitis viral / Enterovirus frequency in children with viral meningoencephalitis

Introducción: el enterovirus es uno de los agentes causales que suelen afectar el sistema nervioso central. Objetivos: determinar la frecuencia de enterovirus en niños hospitalizados con meningoencefalitis. Métodos: se efectuó un estudio descriptivo-observacional de 66 infantes con meningoencefalitis viral, ingresados en el Hospital Pediátrico Provincial "Dr. Eduardo Agramonte Piña" de la provincia de Camagüey, desde enero de 2011 hasta julio de 2012. Resultados: 26,6 % de los afectados fueron aislados por enterovirus en el año 2011 y 84,3 % en el 2012. El agente diagnosticado fue ECHO virus 30, el cual afectó todas las edades con positividad entre 63,0 y 100,0 %. Prevaleció el sexo masculino (78,4 %) procedentes de 11 municipios, con positividades superiores a 70 % en Florida y Camagüey. Los síntomas predominantes fueron cefaleas, fiebre, vómitos y malestar general. A la mayoría de los pacientes se le realizó estudio citoquímico del líquido cefaloraquídeo entre 10 y 199 células por 10(6)/L con predominio linfocitario. Conclusiones: gran parte de los afectados evolucionaron satisfactoriamente con hospitalización de solo 4 días.

Introduction: the enterovirus is one of the causal agents usually affecting the central nervous system. Objectives: to determine the enterovirus frequency in children hospitalized with meningoencephalitis. Methods: a descriptive-observational study of 66 infants with viral meningoencephalitis admitted in "Dr. Eduardo Agramonte Piña" Provincial Pediatric Hospital was carried out in Camagüey province from January, 2011 to July, 2012. Results: 26.6% of the affected ones were isolated due to enterovirus in the year 2011 and 84.3% in 2012. The diagnosed agent was ECHO virus 30, which affected all the ages with positivity between 63.0 and 100.0%. The male sex prevailed (78.4%) coming from 11 municipalities, with positivities higher than 70% in Florida and Camagüey. The predominant symptoms were migraines, fever, vomits and general uneasiness. Most of the patients had a cytochemical study of the cerebrospinal fluid from 10 and 199 cells per 106/L with lymphocytes prevalence. Conclusions: great number of the affected patients had a satisfactory clinical course with hospital stay of just 4 days.

Frecuencia de enterovirus en niños con meningoencefalitis viral / Frequency of enterovirus in children with viral meningoencephalitis

Se realiza un estudio en infantes con meningoencefalitis viral ingresados en el Hospital Pediátrico Provincial de Camagüey Dr Eduardo Agramonte Piña en el período comprendido desde enero 2011 hasta 31 de julio de 2012. Los enterovirus constituyen agentes etiológicos que tienen predilección por el sistema nervioso central. Las muestras de heces fecales se envían al Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología, acompañadas de datos generales, hallazgos de laboratorio y evolución del paciente y remitidas al Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí de La Habana para diagnóstico virológico mediante técnica de secuenciación del ácido nucleico. Existe afectación de la población infantil por ECHO virus 30 provocando meningoencefalitis viral de curso benigno, sin excluir complicaciones en algunos pacientes, de allí el valor de la vigilancia de esta enfermedad en el sistema de salud(AU)

One study was performed in infants with viral meningoencephalitis admitted Provincial Pediatric Hospital Dr Eduardo Agramonte Piña Camagüey from January 2011 to July 31, 2012. The Enteroviruses are etiologic agents that have a predilection for the central nervous system. The stool samples are sent to the Provincial Center of Hygiene, Epidemiology and Microbiology, accompanied by general data, laboratory findings, and patients outcome that are and sent to the Institute of Tropical Medicine Pedro Kouri Havana for virus diagnosis by sequencing technique nucleic acid. There is involvement of children by ECHO 30 virus causing viral benign meningoencephalitis, without excluding complications in some patients, hence the value of surveillance of this disease in the health system

Evidence for nonpoliovirus enterovirus multiplication in L20B cells

Stool specimens collected from 1 515 healthy children following a mass vaccination campaign in Cuba were tested for poliovirus excretion using L20B cell lines. In spite of the selectivity of this cell line for polioviruses (117/129; 90.7 percent) some other nonpolio enteroviruses (12/129; 9.3 percent), such as coxsackie A virus types 4, 8 and 10, can grow in L20B cells.

Se estudió la excreción de poliovirus en muestras de heces fecales de 1 515 niños saludables, colectados después de la campaña de vacunación en Cuba con el empleo de células L20B. A pesar de la selectividad de esta línea celular para poliovirus (117/129; 90,7 por ciento), algunos enterovirus nopoliovirus (12/129; 9,3 por ciento), como los coxsackievirus A tipos 4, 8 y 10, pueden crecer en células L20B.

Evidence for nonpoliovirus enterovirus multiplication in L20B cells

Stool specimens collected from 1 515 healthy children following a mass vaccination campaign in Cuba were tested for poliovirus excretion using L20B cell lines. In spite of the selectivity of this cell line for polioviruses (117/129; 90.7 percent) some other nonpolio enteroviruses (12/129; 9.3 percent), such as coxsackie A virus types 4, 8 and 10, can grow in L20B cells(AU)

Se estudió la excreción de poliovirus en muestras de heces fecales de 1 515 niños saludables, colectados después de la campaña de vacunación en Cuba con el empleo de células L20B. A pesar de la selectividad de esta línea celular para poliovirus (117/129; 90,7 por ciento), algunos enterovirus nopoliovirus (12/129; 9,3 por ciento), como los coxsackievirus A tipos 4, 8 y 10, pueden crecer en células L20B(AU)

Evidence for nonpoliovirus enterovirus multiplication in L20B cells.

Stool specimens collected from 1 515 healthy children following a mass vaccination campaign in Cuba were tested for poliovirus excretion using L20B cell lines. In spite of the selectivity of this cell line for polioviruses (117/129; 90.7%) some other nonpolio enteroviruses (12/129: 9.3%), such as coxsackie A virus types 4, 8 and 10, can grow in L20B cells.

Aislamientos de poliovirus vacunal y respuesta inmune con diferentes dosis de vacuna oral antipoliomielítica / Isolations of poliovirus vacunal and immune response with different doses from antipoliomielítica oral vaccine

Se estudiaron muestras de heces y sueros obtenidos en niños menores de 3 años de edad para incrementar el conocimiento de las circulaciones de los virus vacunales durante las campañas masivas. El uso de vacuna oral antipoliomielítica (VOP) con esquemas de campañas masivas, permite la circulación del virus vacunal 2 meses después de concluidas estas. El empleo de esquemas de vacunación continua permite la circulación del virus vacunal a períodos de tiempo mayor e incluso, en poblaciones con baja cobertura de inmunidad, pueden surgir brotes epidémicos de los virus derivados de la vacuna. El total de poliovirus vacunal aislados en los niños de 2 años (11 casos, 11,0 por ciento) y las reactivaciones de anticuerpos neutralizantes (51 casos, 51,0 por ciento), demuestran una contradicción entre la verificación de las infecciones por aislamientos de los virus y los resultados de reactivación. Los bajos porcentajes de aislamientos de virus vacunal y los porcentajes significativamente altos de seroconversiones o reactivaciones a poliovirus, permiten inferir la ocurrencia de circulación silenciosa. La circulación silenciosa autolimitada a los 2 meses de concluida la campaña es debida, entre otras causas, a la respuesta inmune, homóloga o no, inducida por la infección primaria con la primera dosis de la VOP y por las infecciones secundarias. La autolimitación de la circulación de los poliovirus en campañas masivas es una excelente prevención de los riesgos que representan los virus derivados de la vacuna surgidos en vacunaciones con esquemas continuos

Aislamientos de poliovirus vacunal y respuesta inmune con diferentes dosis de vacuna oral antipoliomielítica / Isolations of poliovirus vacunal and immune response with different doses from antipoliomielítica oral vaccine

Se estudiaron muestras de heces y sueros obtenidos en niños menores de 3 años de edad para incrementar el conocimiento de las circulaciones de los virus vacunales durante las campañas masivas. El uso de vacuna oral antipoliomielítica (VOP) con esquemas de campañas masivas, permite la circulación del virus vacunal 2 meses después de concluidas estas. El empleo de esquemas de vacunación continua permite la circulación del virus vacunal a períodos de tiempo mayor e incluso, en poblaciones con baja cobertura de inmunidad, pueden surgir brotes epidémicos de los virus derivados de la vacuna. El total de poliovirus vacunal aislados en los niños de 2 años (11 casos, 11,0 por ciento) y las reactivaciones de anticuerpos neutralizantes (51 casos, 51,0 por ciento), demuestran una contradicción entre la verificación de las infecciones por aislamientos de los virus y los resultados de reactivación. Los bajos porcentajes de aislamientos de virus vacunal y los porcentajes significativamente altos de seroconversiones o reactivaciones a poliovirus, permiten inferir la ocurrencia de circulación silenciosa. La circulación silenciosa autolimitada a los 2 meses de concluida la campaña es debida, entre otras causas, a la respuesta inmune, homóloga o no, inducida por la infección primaria con la primera dosis de la VOP y por las infecciones secundarias. La autolimitación de la circulación de los poliovirus en campañas masivas es una excelente prevención de los riesgos que representan los virus derivados de la vacuna surgidos en vacunaciones con esquemas continuos(AU)

[Isolates of poliovirus vaccine and immune response to different doses of oral polio vaccine]. / Aislamientos de poliovirus vacunal y respuesta inmune con diferentes dosis de vacuna oral antipoliomielítica.

Samples of feces and sera obtained from 3-year-old children were studied to increase the knowledge about the circulations of virus vaccines during the massive campaigns. The use of the oral polio vaccine with schemes of massive campaigns allows the circulation of the virus vaccine 2 months after their completion. The use of continual vaccination schemes makes possible the circulation of the virus vaccine for longer periods of time. Even in populations with a low immunity coverage, epidemic outbreaks of the vaccine-derived virus may appear. The total of poliovirus vaccine isolated in 2-year-old children (11 cases, 11.0 %) and the boosts of neutralizing antibodies (51 cases, 51.0 %), show a contradiction between the verification of the infections caused by isolations of the viruses and the results of boosts. The low percentage of isolations of virus vaccine and the highly significant percentages of of seroconversions or boosts to polio virus, allow to infer the occurrence of silent circulation. The silent circulation self limited to 2 months after concluding the campaign is due, among other causes, to the homologous or not induced response by the primary infection with the first dose of oral polio vaccine and by the secondary infections. The self limitation of the circulation of the polio viruses in massive campaigns constitutes an excellent prevention of the risks represented by the vaccine-derived viruses appearing in vaccinations with continual schemes.

Aplicación de la secuenciación nucleotídica de VP1 a la identificación de Enterovirus humanos

Se describió la introducción de un método molecular para la identificación de los Enterovirus basado en la amplificación, secuenciación y análisis filogenético de la proteína VP1. Se demostró que este método reduce grandemente el tiempo requerido para la identificación de los Enterovirus aislados y resulta de gran utilidad en la caracterización de aislamientos difíciles de tipificar, con el empleo de los reactivos inmunológicos de rutina. Por la rapidez de ejecución de la técnica reviste vital importancia su uso durante epidemias, dada la rápida determinación del agente causal.

The introduction of a mollecular method to identify the Entoviruses based on the amplification, sequencing and phylogenetic analysis of protein VP1 was described. It was proved that this method reduces significantly the time required for the identification of the isolated Entoviruses and that it is very useful in the characterization of isolates which are difficult to typify by the routine immunoloigical reagents. As it is a very fast technqiue, its use is very important during epidemics to determine the causal agent rapidly.

Cambios genéticos en cepas de poliovirus tipo 2 aisladas de pacientes con poliomielitis paralítica asociada a la vacuna / Genetic changes in strains of poliovirus type 2 isolated from patients with vaccine-associated paralytic poliomyelitis

En la actualidad la poliomielitis es un padecimiento raro en países desarrollados, donde solamente parecen circular cepas vacunales, que reemplazan al poliovirus salvaje. Sin embargo, es todavía una seria enfermedad para niños de países subdesarrollados de Asia y África. Pacientes y métodos. Se analizan nueve cepas de poliovirus tipo 2 aisladas de heces fecales de pacientes con poliomielitis paralítica asociada a la vacuna (PPAV), desde el inicio de las campañas de vacunación antipolio en nuestro país. Las mismas se sometieron a secuenciación de un fragmento de 114 pares de bases de la región 5NTR (non traductional region), donde radica uno de los principales determinantes de atenuación/reversión a la neurovirulencia de los poliovirus en la posición del nucleótido 481. Resultados. Se observó un cambio en dicha posición de guanina por adenina en todas las cepas secuenciadas, de modo que coincide con la secuencia homóloga de la cepa salvaje, así como con la de cepas obtenidas de niños sanos inmunizados con la vacuna de virus vivo atenuado. Esto presupone la necesidad de que se presenten otros cambios o incidan otros factores para que se presente o no PPAV, por lo que se sugiere la secuenciación de otras regiones del genoma en busca de otros posibles cambios nucleotídicos diferenciales...(AU)

Detección rápida de Enterovirus mediante un método directo de reacción en cadena de la polimerasa / Quick detection of Enterovirus by means of a direct method of reaction in chain of the polimerasa

Se desarrolló un método directo y económico de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de Enterovirus, que no requiere pasos previos de extracción de ácido ribonucleico (ARN), a partir de sobrenadantes de cultivos celulares infectados. El sistema se desarrolló mediante cebadores universales del género Enterovirus y cebadores específicos de la cepa vacunal Sabin 1. Los resultados obtenidos demuestran que la ausencia de métodos de extracción y purificación de ARN previos a la reacción no afectan la sensibilidad y especificidad del sistema, lo que posibilita que pueda ser utilizado para la detección rápida de genomas de Enterovirus e identificación de cepas vacunales de poliovirus(AU)

Valoración de una novedosa tecnología para la detección de enterovirus en aguas negras / Valuation of a novel technology for the enterovirus detection in black waters

Se reportó la valoración de una novedosa tecnología para la detección de enterovirus en aguas negras, basada en un método de recuperación viral que emplea el polietilenglicol como agente concentrador y el uso combinado del aislamiento viral y la reacción en cadena de la polimerasa, como técnicas de detección e identificación viral. Se confirmó que el método de recuperación viral es de alta eficiencia pues permite recuperar la totalidad de virus presentes en las aguas negras, y preservar su capacidad infectiva. Se demostró que la reacción en cadena de polimerasa (RCP) es menos sensible que el cultivo celular para la detección de enterovirus en aguas negras. También el método del isotiocianato de guanidina (GnTCN), cuyos componentes se pueden preparar en el laboratorio, es posible utilizarlo como alternativa para la extracción y purificación de ácidos nucleicos en sustitución del método comercial del TRIZOL, que es el recomendado por la Organización Mundial de la Salud en estos casos(AU)

Caracterización intratípica de Poliovirus por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa

Se introdujo la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa para la caracterización intratípica de Poliovirus. Se usaron cebadores que sólo promueven la ampliación de las cepas vacunales de Sabin, comprobada por corrida electroforética de los productos de ADN amplificados (Sabin 1-97 pb, Sabin 2-71 pb, Sabin 3-44 pb) y cuya especificidad se verificó satisfactoriamente. Se estudiaron por esta técnica 23 cepas cubanas de Poliovirus aisladas e identificadas en el Laboratorio de Enterovirus del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" de 1993 a 1994, y todas resultaron ser del tipo vacunal. Se observó cómo el Poliovirus vacunal de Sabin puede ser causa de meningoencefalitis viral como complicación neurológica más leve. Este estudio aportó una evidencia más a favor de la no circulación del Poliovirus salvaje en Cuba.

The polimerase chain reaction techniques was introduced for the intratypic characterization of Poliovirus. Primers were used only to promote the amplification of the Sabin vaccine strains proved by electrophoretic run of the amplified DNA products (Sabin 1 - 97 pb, Sabin 2 - 71 pb, Sabin 3 - 44 pb) and whose specificity was satisfactorily verified. 23 Cuban poliovirus strains isolated and identified at the Laboratory of Enterovirus of the "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute from 1993 to 1994 were studied by this technique. All of them were of the vaccine type. It was observed how the Sabin vaccine poliovirus may be the cause of viral meningoencephalitis as a milder neurological complication. Tghis study provided one more evidence about the non circulation of the wild poliovirus in Cuba.

Estudio de un brote de meningoencefalitis viral: comparación de 2 sistemas biológicos empleados para el aislamiento / Study of an aoutbreak of viral meningoencephalitis: comparison of 2 biological systems used for isolation

Entre los meses de octubre y diciembre de 1995 se reportó un incremento en los casos de meningoencefalitis viral en nuestro país. Se recibieron 23 muestras de heces fecales, que procedían de 2 provincias, con la finalildad de obtener el aislamiento viral mediante la inoculación de éstas en cultivo de células y ratones recién nacidos simultáneamente, para comparar la sensibilidad de ambos sistemas en el aislamiento. Se obtuvo un mayor número de aislamientos en cultivo de células que en ratones, el cultivo de células de riñón de mono verde africano adulto normal (Vero) resultó el más sensible. Se lograron 18 aislamientos, que fueron identificados como Coxsackievirus B5. Se realizó un estudio anatomo-patológico en ratones inoculados y se observaron lesiones compatibles con la infección enteroviral

Características antigénicas de los virus aislados del líquido cefalorraquídeo de pacientes con neuropatía epidémica / Antigenic characteristics of the viruses isolated from the cerebrospinal fluid of patients with epidemic neuropathy

Durante la epidemia de neuropatía ocurrida en Cuba en los años 1992/1994 se aislaron del líquido cefalorraquídeo de pacientes agentes virales relacionados antigénicamente con los virus Coxsackie. Para establecer una función de estos virus en la etiopatogenia de la enfermedad se seleccionaron las cepas 47/93 IPK identificada como Coxsackie A9 y la cepa 44/93 IPK de efecto citopático ligero (ECP-L) y se realizó un estudio de sus características antigénicas mediante Western Blot. Se comprobó la relación antigénica entre ambas cepas y se demostró la ausencia de proteínas estructurales en su forma nativa en los agentes de ECP-L. A partir de estos resultados se plantea la posibilidad de que la persistencia sea un mecanismo por el cual estos virus participen en la etiopatogenia de la neuropatía epidémica en Cuba